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雞白痢抗體檢測(PD)ELISA試劑盒標本要求

發布時間: 2022-04-20  點擊次數: 50次
  雞白痢抗體檢測(PD)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被雞白痢抗體檢測(PD)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞白痢抗體檢測(PD)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  
  雞白痢抗體檢測(PD)ELISA試劑盒標本要求:
  
  1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  2、血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  3、組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。注:標本溶血會影響檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
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